1. 腫瘤浸潤淋巴細胞

　　腫瘤浸潤淋巴細胞(Tumor Infiltrating Lymphocyte, TIL)是從手術切除的腫瘤組織或轉移的淋巴結中分離的淋巴細胞，經細胞因子(如白細胞介素2)誘導活化，經大量擴增后回輸給病人。

　　2. TIL的分離與培養

　　臨床應用需獲得足夠的TIL細胞，這取決于實際浸潤TIL細胞的數量及分離、擴增TIL方法。臨床應用的TIL細胞主要來源于手術切除或活檢所得的瘤體組織、癌性胸水、腹水中淋巴細胞及轉移淋巴結。目前國內外實驗室分離培養TIL方法可獲得較理想的TIL群體。

　　3. 國內外應用TIL治療黑色素瘤的臨床研究

　　過繼細胞治療的優點決定了它在腫瘤生物治療中的地位，已有的臨床研究也大都提示其具有良好的應用前景。

　　年Rosenberg等首次應用TIL靜脈回輸并聯合IL -2、環磷酰胺治療20例惡性黑色素瘤，其中12例達到部分或完全消退。年Steven A Rosenberg總結了NCI從年至年治療的86例晚期黑色素瘤患者，總有效率(%CR+PR)為34 %(表1)。詳見Journal of the National Cancer I
titute, Vol. 86, No. 15, August 3,

　　近來的動物實驗提示在過繼細胞治療前清除宿主的內源性淋巴細胞(包括調節性T細胞)對治療的成功與否至關重要。美國NCI外科部先采用環磷酰胺聯合氟達拉濱清除體內免疫細胞，然后將體外擴增的患者自身TIL回輸進行過繼細胞治療。結果顯示，對于其他療法已無效的黑色素瘤患者采用上述治療獲得了51.4%的緩解率(8.6%CR+ 42.8%PR)，且平均緩解期達11.5±2.2個月，包括腦部在內的臟器均對治療出現了反應(圖1-3)。另外，Richard Morgan等還通過用體外給患者外周血T淋巴細胞轉導某種腫瘤抗原特異性的TCR的方法制備腫瘤特異性的T細胞，然后將轉導了TCR的T細胞大量擴增后回輸給患者。結果顯示，15例轉移性黑色素瘤病人治療后有2例獲得了PR，緩解期分別達到了20和21個月。這一效應細胞制備策略為拓展過繼細胞治療的應用范圍提供了全新的思路。

　　圖1. 55歲男性黑色素瘤患者伴腋下及腦轉移經TIL治療1個月后病灶開始消退，3個月獲得完全緩解。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　圖2. 45歲男性黑色素瘤患者伴多發肝轉移，經TIL治療后獲得完全緩解，緩解期超過4 年。

　　圖3. 30歲男性黑色素瘤患者伴皮下轉移，經

　　TIL治療2周內轉移灶開始消退，并獲得完全緩解且完全緩解期超過2年。

　　Chapter 70: Cancer Immunotherapy Cancer: Principles & Practice of Oncology, 8th Edition -Devita, Hellman & Rosenberg's

　　新的的一項研究中，Steven Rosenberg等采用化療聯合全身照射(Total Body Irradiation, TBI)的方法徹底清除患者體內的免疫細胞后將體外擴增的TIL回輸。結果顯示，化療+TIL治療組43例黑色素瘤患者有效率為49%;化療+2Gy TBI+過繼治療組25例患者有效率為52%;化療+12Gy TBI+過繼治療組25例患者有效率為72%(表1)。

　　表1 轉移性黑色素瘤患者過繼免疫治療

　　治療病例數有效率 (n(%))

　　PRCROR

　　No TBI(39.5)4(9.3)21(48.8)

　　2 Gy TBI(44.0)2(8.0)13(52.0)

　　12 Gy TBI(56.0)4(16.0)18(72)

　　注：所有患者均接受化療和ACT其中化療方案為環磷酰胺60 mg/kg 2天;氟達拉濱25mg/m2 5天。CR, 完全緩解; OR, 總有效率; PR, 部分緩解。

　　Steven A. Rosenberg Nature Reviews Cancer volume 8 April

　　我科采用DC-CIK過繼治療來替代大劑量化療從而達到改善患者免疫狀況的目的。DC-CIK、TIL序貫治療后患者一般狀況顯著改善，肺部轉移灶消失，肝轉移灶縮小;免疫功能監測結果顯示，DC-CIK治療后患者免疫功能明顯改善。見圖4、5、6。

　　Day 0

　　采血

　　Day 13手術

　　Day 36

　　TIL回輸

　　Day 14、15

　　DC-CIK回輸